Приложение Ж
(справочное)
БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЩЕЙ БИОЛОГИЧЕСКОЙ ЧИСТОТЫ ПОВЕРХНОСТЕЙ
Метод распространяется на материалы поверхностей и позволяет определить общую биологическую чистоту по количеству аденозин-5'-трифосфорной кислоты динатриевой соли (АТФ).
Ж.1. Аппаратура, материалы, реактивы
Люминометр.
Микрокюветы из полистирола.
Тампоны ватные, стерильные.
Пробирки стерильные объемом 1,5 мл (типа "эппендорф").
Дозатор автоматический постоянного объема 0,02 мл.
Дозатор автоматический постоянного объема 0,10 мл.
Реактив N 1 - АТФ-реагент.
Реактив N 2 - раствор для реконструкции АТФ-реагента.
Реактив N 3 - АТФ-контроль.
Реактив N 4 - раствор реагента для разрушения клеток.
Реактив N 5 - раствор для смачивания тампонов.
Ж.2. Подготовка к испытанию
Ж.2.1. Во флакон с реактивом N 1 вносят 4 мл раствора из флакона с реактивом N 2, выдерживают 30 мин перед использованием. Полученный раствор АТФ-реагента хранят при комнатной температуре в течение рабочего дня, а при 4 °C - в течение двух - трех дней.
Ж.2.2. Во флакон с реактивом N 3 вносят 1 мл раствора из флакона с реактивом N 5, перемешивают. Раствор АТФ-контроля следует использовать в течение 2 - 3 ч.
Ж.2.3. Пробирки (типа "эппендорф") нумеруют по количеству анализируемых поверхностей, устанавливают в штатив, вносят в них по 0,2 мл реактива N 4 и добавляют одну пробирку для АТФ-контроля.
Ж.2.4. Производят калибровку АТФ-реагента по АТФ-контролю, для чего кончик тампона погружают в раствор с АТФ-контролем и выдерживают в течение 20 сек. Вынимают увлажненный тампон из раствора и помещают в пробирку с 0,2 мл раствора для разрушения бактериальных клеток. Извлекают тампон из пробирки, отжав излишек жидкости о стенку.
Ж.2.5. Помещают микрокювету с помощью пинцета в кюветное отделение люминометра.
С помощью автоматических дозаторов вносят в нее:
- 0,02 мл раствора АТФ-контроля;
- 0,10 мл раствора АТФ-реагента.
Быстро перемешивают содержимое микрокюветы, прокачав его 2 - 3 раза через наконечник дозатора, и измеряют биолюминесцентный сигнал на люминометре.
Ж.2.6. Повторяют измерения и находят среднее значение биолюминесцентного сигнала для АТФ-контроля (Iконтр).
Ж.3. Проведение испытания
Ж.3.1. Для каждого образца поверхности используют новый стерильный ватный тампон. Погружают кончик тампона в реактив N 5 и выдерживают в течение 20 с.
Ж.3.2. Влажным тампоном тщательно протирают исследуемую поверхность, перемещая тампон сначала - по горизонтали, затем - по вертикали, и в конце - по диагонали. Площадь поверхности выбирают потребители.
Ж.3.3. Помещают тампон в пробирку с 0,2 мл раствора для разрушения бактериальных клеток, выдерживают в течение 1 - 2 мин, периодически вращая. Извлекают тампон из пробирки, отжав излишек жидкости о стенку, и закрывают пробирку.
Ж.3.4. Помещают микрокювету с помощью пинцета в кюветное отделение люминометра. С помощью автоматических дозаторов вносят в нее:
- 0,02 мл раствора АТФ-контроля;
- 0,10 мл раствора АТФ-реагента.
Быстро перемешивают содержимое микрокюветы, прокачав его два - три раза через наконечник дозатора, и измеряют биолюминесцентный сигнал на люминометре.
Ж.3.5. Повторяют операции с использованием второй микрокюветы. Находят среднее значение биолюминесцентного сигнала для исследуемого образца (Iобр).
Ж.3.6. Рассчитывают концентрацию АТФ в исследуемом растворе по формуле:
(АТФ)обр = 2,3 (Iобр / Iконтр), пикомоль/мл
Ж.3.7. Оценивают степень загрязненности поверхности по таблице:
Концентрация АТФ, пикомоль/мл
|
Степень загрязненности образца
|
< 0,01
|
Чисто
|
0,01 - 0,02
|
Недостаточно чисто
|
0,02 - 0,1
|
Грязно
|
>= 0,1
|
Очень грязно
|
Длительность испытания - 5 - 7 мин на один образец поверхности.
При выполнении каждой операции следует использовать новый стерильный наконечник для автоматических дозаторов.
Библиография
КонсультантПлюс: примечание.
В официальном тексте документа, видимо, допущена опечатка: Санитарно- эпидемиологические правила имеют номер СП 3.5.1378-03, а не СП 3.5.1376-03.
|
[1]
|
СП 3.5.1376-03
|
Санитарно-эпидемиологические требования к организации и осуществлению дезинфекционной деятельности
|
[2]
|
Единый тарифно-квалификационный справочник работ и профессий рабочих. Выпуск 01
|
[3]
|
Единый тарифно-квалификационный справочник работ и профессий рабочих. Выпуск 52
|
[4]
|
Квалификационный справочник должностей руководителей, специалистов и других служащих, утвержденный Постановлением Министерства труда РФ от 21 августа 1998 г. N 37
|
[5]
|
СанПиН 2.1.3.2630-10
|
Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность
|
[6]
|
СанПиН 2.4.2.2821-10
|
Санитарно-эпидемиологические требования к условиям и организации обучения в общеобразовательных учреждениях
|
[7]
|
СП 2.3.6.1066-01
|
Санитарно-эпидемиологические требования к организациям торговли и обороту в них продовольственного сырья и пищевых продуктов. Санитарно-эпидемиологические правила
|
[8]
|
СП 2.3.6.1079-01
|
Санитарно-эпидемиологические требования к организациям общественного питания, изготовлению и оборотоспособности в них пищевых продуктов и продовольственного сырья
|
[9]
|
Правила бытового обслуживания населения в Российской Федерации, утвержденные Постановлением Правительства Российской Федерации от 15 августа 1997 г. N 1025 (с последующими изменениями и дополнениями)
|
[10]
|
Федеральный закон Российской Федерации от 30 марта 1999 г. N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения" с изменениями и дополнениями
|
[11]
|
СанПиН 2.1.2.1188-03
|
Плавательные бассейны. Гигиенические требования к устройству, эксплуатации и качеству воды. Контроль качества. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы
|
[12]
|
СанПиН 2.1.2.2631-10
|
Санитарно-эпидемиологические требования к размещению, устройству, оборудованию, содержанию и режиму работы организаций коммунально-бытового назначения, оказывающих парикмахерские и косметические услуги. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы
|
[13]
|
СанПиН 2.1.2.2645-10
|
Санитарно-эпидемиологические требования к условиям проживания в жилых зданиях и помещениях. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы
|
[14]
|
СанПиН 2.4.1201-03
|
Гигиенические требования к устройству, содержанию, оборудованию и режиму работы специализированных учреждений для несовершеннолетних, нуждающихся в социальной реабилитации
|
[15]
|
СанПиН 2.4.1.2660-10
|
Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, содержанию и организации режима работы в дошкольных организациях
|
[16]
|
СанПиН 2.4.2.2843-11
|
Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, содержанию и организации работы детских санаториев. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы
|
[17]
|
СанПиН 2.4.4.3155-13
|
Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, содержанию и организации работы стационарных организаций отдыха и оздоровления детей
|
[18]
|
СанПиН 982-72
|
Санитарные правила устройства, оборудования и содержания бань
|
[19]
|
СанПиН 983-72
|
Санитарные правила устройства и содержания общественных уборных
|
[20]
|
СП 2.1.2.2844-11
|
Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию общежитий для работников организаций и обучающихся образовательных учреждений
|
[21]
|
СанПиН 42-128-4690-88
|
Санитарные правила содержания территорий населенных мест
|
[22]
|
СанПиН 2.4.4.2599-10
|
Гигиенические требования к устройству, содержанию и организации режима в оздоровительных учреждениях с дневным пребываем детей в период каникул
|
[23]
|
СП 2.5.1198-03
|
Санитарные правила по организации пассажирских перевозок на железнодорожном транспорте
|
[24]
|
СП 2.5.1337-03
|
Санитарные правила эксплуатации метрополитенов
|
[25]
|
СП 1567-76
|
Санитарные правила устройства и содержания мест занятий по физической культуре и спорту
|
[26]
|
Правила технической эксплуатации электроустановок потребителей, утв. Приказом Минэнерго РФ от 13.01.2003 г. N 6
|
[27]
|
Правила по охране труда при эксплуатации электроустановок, утв. Приказом Министерства труда и социальной защиты РФ от 24 июля 2013 г. N 382н, зарег. в Минюсте России от 12.12.2013 г. N 30593
|
[28]
|
Федеральный закон от 22 июля 2008 г. N 123-ФЗ "Технический регламент о требованиях пожарной безопасности" с изменениями и дополнениями
|
[29]
|
Федеральный закон "Об отходах производства и потребления" от 24 июня 1998 г. N 89-ФЗ.
|
[30]
|
СанПиН 2.1.7.2790-10
|
Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами
|
 перейти в каталог файлов
| Образовательный портал
Как узнать результаты егэ
Стихи про летний лагерь
3агадки для детей |
Скачать 92.63 Kb.