Методичка по переливанию крови. Министерство здравоохранения и социальногоразвитияроссийский государственный

допустимо переливание переносчиков газов крови группы 0(1) резус отрицательная не более 500 мл. При отсутствии одногруппной плазмы реципиенту может быть перелита плазма группы AB(IV).
4. Индивидуальный подбор компонентов крови в специализированной
лаборатории требуется больным, имеющим в анамнезе указание на
посттрансфузионные осложнения, а также беременности, закончившиеся
рождением детей с гемолитической болезнью новорояаденного, а также
больным, имеющим аллоиммунные антитела. При необходимости многократных трансфузий у больных с миелодепрессией или апластическим синдромом исследуют фенотип больного с целью подбора соответствующего донора.
5. Транспортировка компонентов крови может осуществляться только
медицинским персоналом, несущим ответственность за соблюдение правил
транспортировки. Необходимо оберегать компоненты крови от встряхивания, ударов, перевертывания и перегрева, клеточные компоненты - от замораживания.
Переохлаждение или перегревание компонентов крови при транспортировке ведет к гемолизу. Поэтому при длительности транспортировки более получаса компоненты крови должны находиться в изотермическом контейнере (сумке- холодильнике), причем при сроке транспортировки несколько часов или при температуре окружающей среды выше 20°С необходимо использование сухого льда или аккумуляторов холода.
6. При поступлении больного в стационар в плановом порядке группу
крови по системе АВО и резус-принадлежность определяет врач или другой
специалист, имеющий подготовку по иммуносерологии. Бланк с результатом исследования вклеивают в историю болезни. Лечащий врач переписывает данные результата исследования на лицевую сторону титульного листа истории болезни и скрепляет своей подписью. Запрещается переносить данные о группе крови и
резус-принадлежности на титульный лист истории болезни с других
документов.
План выполнения операции переливания компонентов крови обсуждается и согласовывается с пациентом в письменном виде, а при необходимости - с его близкими. Согласие пациента оформляется в соответствии с образцом, приведенном в Приложении, и подшивается к истории болезни или карте амбулаторного больного.
В случаях, когда состояние больного не позволяет ему выразить свою волю, а показания неотложны, вопрос о проведении гемотрансфузии решает консилиум, а при невозможности собрать консилиум - непосредственно лечащий (дежурный) врач с последующим уведомлением должностных лиц лечебно-профилактического учреждения.
7. Перед тем, как приступить к переливанию компонентов крови,
необходимо убедиться в их пригодности для переливания. Врач, переливающий трансфузионную среду, визуально проверяет герметичность упаковки, правильность паспортизации, макроскопически оценивает качество гемотрансфузионной среды.
Определять годность гемотрансфузионной среды необходимо при достаточном освещении непосредственно на месте хранения, не допуская взбалтывания.
ю

Критериями годности для переливания являются: для цельной крови - прозрачность плазмы, равномерность верхнего слоя эритроцитов, наличие четкой границы между эритроцитами и плазмой; для свежезамороженной плазмы - ее прозрачность после размораживания при комнатной температуре. При наличии тусклого цвета, потере прозрачности, появлении взвеси в виде хлопьев или пленок гемотрансфузионная среда переливанию не подлежит.
8. Независимо от произведенных ранее исследований и имеющихся записей
в истории болезни, врач, производящий трансфузию компонентов крови,
обязан лично провести следующие контрольные исследования:
- Перепроверить группу крови реципиента по системе АВО, сверить полученный результат с данными в истории болезни.
- При переливании эритроцитсодержащих компонентов крови перепроверить группу крови донорского контейнера по системе АВО и сопоставить результат с данными на этикетке контейнера. При переливании корректоров гемостаза и фибринолиза и средств коррекции иммунитета определяется только группа крови
АВО и резус-принадлежность реципиента, а групповую и резус-принадлежность донора врач устанавливает по этикетке на контейнере с трансфузионной средой.
- Сравнить группу крови и резус-принадлежность, обозначенные на контейнере, с результатами исследования, ранее внесенными в историю болезни и только что полученными.
- Во всех без исключения случаях переливания эритроцитсодержащих компонентов крови необходимо провести до начала переливания пробу на индивидуальную совместимость по системам АВО и резус эритроцитов донора и сыворотки реципиента. Проба должна быть проведена одним из двух способов: 1) двухэтапная проба в пробирках с антиглобулином или 2) проба на плоскости при комнатной температуре и одна из трех проб (непрямая реакция Кумбса, реакция конглютинации с 10%-ным желатином или реакция конглютинации с 33%-ным полиглюкином). Если эритроцитная масса или взвесь подобраны реципиенту индивидуально в специализированной лаборатории, врач, выполняющий трансфузию, перед переливанием определяет группу крови реципиента, донора и проводит только одну пробу на индивидуальную совместимость - на плоскости при комнатной температуре. При переливании корректоров гемостаза и фибринолиза и средств коррекции иммунитета пробу на индивидуальную совместимость не проводят.
- Уточнить у реципиента фамилию, имя, отчество, год рождения и сверить их с указанными на титульном листе истории болезни (за исключением случаев, когда переливание проводится под наркозом или пациент находится в бессознательном состоянии).
9. Переливание гемотрансфузионных сред имеет право проводить лечащий
или дежурный врач, имеющий специальную подготовку, во время операции -
хирург или анестезиолог, непосредственно не участвующий в операции или
наркозе, а также врач отделения или кабинета переливания крови, специалист-
трансфузиолог. Переливание производится медицинским персоналом при
п

соблюдении правил асептики и антисептики с использованием одноразовых
устройств для внутривенного введения, имеющих фильтр. Запрещено введение в контейнер с компонентом крови каких-либо других медикаментов или растворов, кроме 0,9%-го стерильного изотонического раствора хлорида натрия.
В начале трансфузии необходимо провести биологическую пробу.
10. После окончания переливания донорский контейнер с небольшим
количеством оставшейся гемотрансфузионной среды и пробирка с кровью
реципиента и плоскость, использованные для проведения проб на
индивидуальную совместимость, подлежат обязательному сохранению в
холодильнике в течение 48 часов.
11. Врач, проводящий переливание компонентов крови, при каиедой
трансфузии обязан зарегистрировать в медицинскую карту больного:
- показания к переливанию компонента крови;
- до начала трансфузии: паспортные данные с этикетки донорского контейнера, содержащие сведения о коде донора, группе крови по системам АВО и резус, номере контейнера, дате заготовки, название учреждения службы крови (после окончания трансфузии этикетка открепляется от контейнера с компонентом крови и вклеивается в медицинскую карту больного);
- результат контрольной проверки групповой принадлежности крови реципиента по АВО и резус;
- результат контрольной проверки групповой принадлежности крови или эритроцитов, взятых из контейнера, по АВО и резус;
- результат проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента;
- результат биологической пробы.
Рекомендуется для каждого реципиента, особенно при необходимости многократных трансфузий компонентов крови, дополнительно к медицинской карте больного иметь трансфузионную карту (дневник), в которой фиксируются все трансфузии, проведенные больному, их объем и переносимость.
12. Реципиент после переливания соблюдает в течение двух часов
постельный режим и наблюдается лечащим или дежурным врачом. Ежечасно ему измеряют температуру тела и артериальное давление, фиксируя эти показатели в медицинской карте больного. Контролируется наличие и почасовой объем мочеотделения и сохранение нормального цвета мочи. Появление красной окраски мочи при сохранении прозрачности свидетельствует об остром гемолизе. На следующий день после переливания обязательно производят клинический анализ крови и мочи.
При амбулаторном проведении гемотрансфузии реципиент после окончания переливания должен находиться под наблюдением врача не менее трех часов. Только при отсутствии каких-либо реакций, наличии стабильных показателей артериального давления и пульса, нормальном мочеотделении он может быть отпущен из лечебного учреждения.
12

Техника иммуносерологических исследований
Все методы определения группы крови основаны на реакциях, развивающихся вследствие взаимодействия одноименных антигенов и антител. Антитело фиксируется на эритроците после соединения с антигенной детерминантой, что вызывает склеивание эритроцитов между собой (агглютинацию) или лизис мембран эритроцитов под действием комплемента, присоединившегося к комплексу антиген- антитело (гемолиз). Агглютинация и гемолиз могут непосредственно наблюдаться макроскопически в отличие от вызвавшего из взаимодействия антигенов и антител.
Но при этом для склеивания или разрушения эритроцитов недостаточно просто образования какого-то количества комплексов антиген-антитело на их поверхности: необходимо определенное соотношение числа молекул антигенов и антител, которые могут провзаимодействовать, а также строго определенные условия среды - температура, кислотность и пр. Только при соблюдении необходимых условий будут обнаружены макропризнаки реакций антиген-антитело, которые позволят определить группу исследуемой крови.
Определение группы крови и резус-принаддежности, пробы на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента проводятся в соответствии с инструкциями по иммуносерологии. Руководствуются также инструкциями-вложениями, которые прилагаются к набору реагентов предприятием- изготовителем. Используют эритроциты и сыворотку крови реципиента не более двухдневного срока хранения при температуре от 2 до 8°С.
Определение группы крови по системе АВО
Все методики определения группы крови по системе АВО основаны на использовании реакции агглютинации эритроцитов при взаимодействии их антигенов с одноименными антителами. Существует 3 основных способа: с помощью стандартных изогемагтлютинирующих сывороток, с помощью стандартных изогемагтлютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов
(перекрестный способ) и с помощью моноклональных антител. Так как антитела к антигенам А и В являются
Холодовыми, процедуру определения следует проводить при температуре 15-25°. Дня нормального протекания реакции агглютинации также требуется избыток антител над антигенами, поэтому объем среды, содержащей антитела, должен в 5-10 раз превышать объем среды, содержащей антигены.
Невыполнение этих правил приводит к ошибкам в определении группы крови.
При плановом исследовании в стационаре определение группы крови производит лечащий врач с использованием моноклональных антител. После этого кровь больного отправляют в серологическую лабораторию, где производится перепроверка перекрестным методом. При расхождении результатов врача и лаборатории оба исследования повторяют. При необходимости экстренного определения группы крови врачу предпочтительно воспользоваться перекрестным методом, так как перепроверка в лаборатории будет произведена, возможно, уже после переливания крови.
13

Определение группы крови с помощью моноклональных антител
Используются искуственно полученные моноклональные антитела - цоликлоны анти-А и анти-В, которые выпускаются в виде порошка и разводятся физиологическим раствором. Цоликлон анти-А имеет красную окраску, цолиьслон анти-В синюю. Цоликлоны наносят на тарелку в две точки под обозначениями анти-
А, анти-В - по 2 капли и рядом по одной капле осадка эритроцитов (соотношение должно соответствовать
10/1).
Сыворотку и эритроциты перемешивают стеклянными палочками. Пластинку периодически покачивают, наблюдая за ходом реакции в течение 3 минут. Интерпретацию результатов производят по таблице:
Агглютинация эритроцитов с цоликлонами
Группа крови
Анти-А
Анти-В
-
-
0(1)
+
-
А(П)
-
+
В(Ш)
+
+
AB(IV)
При наличии агглютинации с обоими реагентами необходимо исключить неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого к капле эритроцитов вместо цолшотонов добавляют каплю физиологического раствора.
Кровь можно отнести к группе AB(IV) только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.
Определение группы крови с помощью стандартных
изогемагглютинирующих сывороток
Используются 2 различные серии стандартных сывороток О, А и В групп крови и одна - группы АВ, изготовленные в специальной лаборатории из донорской крови.
Две серии требуются, так как одна из них может иметь низкую активность и не дать четкой картины агглютинации. Сыворотка каждой группы крови маркируется своим цветом и числом полосок на этикетке.
0(1) - бесцветная без полос,
А(П) - голубая, 2 синих полосы,
В(1П) - красная, 3 красных полосы,
AB(IV) - бесцветная, 4 желтых полосы.
Перед использованием сывороток следует убедиться в их пригодности по сроку хранения (указывается на этикетке), условиям хранения (при температуре 4-8°) и внешнему виду (сыворотка должна быть прозрачной, без хлопьев и осадка). Титр сыворотки, указанный на этикетке, должен быть не ниже 1/32.
На пластинку или тарелку со смачиваемой поверхностью под обозначениями О,
А, В помещают по 2 капли (0,1 мл) изогемагглютинирующих сывороток соответствующей группы крови и рядом по одной маленькой капле осадка эритроцитов исследуемой крови (0,01-0,02 мл). Сыворотку и эритроциты перемешивают стеклянной палочкой - каждый раз чистым концом. Пластинку
14

периодически покачивают, наблюдая за ходом реакции в течение 5 минут. Обычно агглютинация начинается через 10-30 секунд, однако при наличии на эритроцитах антигена А2, обладающего слабой агтлютинабельностью, - через 3-4 минуты. По истечении 5 минут в реагирующую смесь добавляют по 1-2 капли (0,05-0,1 мл) физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов, которая может быть принята за агглютинацию.
При положительной реакции агглютинации происходит обесцвечивание смеси с одновременным появлением в ней зерен или хлопьев красного цвета. При отрицательной реакции агглютинации смесь остается однородной и окрашенной в красный цвет. Интерпретация результатов определения группы крови приведена в таблице:
_____________________________________________________
Агглютинация эритроцитов с сыворотками
Группа крови
О
А
В
-
-
-
0(1)
+
+
А(П)
+
+
-
В(П1)
+
+
+
AB(IV)
В тех случаях, когда наблюдается реакция с сыворотками всех трех групп, необходимо провести дополнительное исследование со стандартной сывороткой
AB(IV) группы для исключения неспецифической агглютинации. Только если реакция с этой сывороткой отсутствует, исследуемую кровь следует отнести к
AB(IV) группе. Точное определение подтипа антигена А проводится в серологической лаборатории с использованием специальных реактивов.
Перекрестный способ
(определение группы крови с помощью стандартных
изогемагтлютинирующих сывороток и стандартных эритроцитов)
При перекрестном способе с помощью стандартных изогемагтлютинирующих сывороток производится определение эритроцитарных антигенов (описано выше) и с помощью стандартных эритроцитов производится определение сывороточных антител исследуемой крови. Используются стандартные эритроциты О, А, В групп крови двух серий, изготовленные в специальной лаборатории из донорской крови.
Их хранение допускается в течение 2-3 суток при 4-8°. Исследуемую кровь центрифугируют и оставляют на полчаса для разделения сыворотки и эритроцитов, после чего используют сыворотку.
На пластинку или тарелку со смачиваемой поверхностью под обозначениями О,
А, В помещают по 2 капли (0,1 мл) исследуемой сыворотки и рядом по одной капле стандартных эритроцитов трех групп крови (0,01-0,02 мл). Сыворотку и эритроциты перемешивают стеклянными палочками. Пластинку периодически покачивают, наблюдая за ходом реакции в течение 5 минут. По истечении 5 минут в реагирующую смесь добавляют по 1-2 капли (0,05-0,1 мл) физиологического раствора для снятия возможной неспецифической агрегации эритроцитов. После этого оценивают результат.
15

Агглютинация сыворотки с
Э]
эитроцитами
Группа крови
О
А
В
-
+
+
0(1)
-
-
+
А(П)
-
+
-
В(Ш)
-
-
-
AB(IV)
Результаты определения группы крови со стандартными изогемагглютинирующими сыворотками и со стандартными эритроцитами должны совпадать. Если это не так, исследование необходимо повторить.

перейти в каталог файлов